剛果紅染色實(shí)驗(yàn)觀察淀粉樣蛋白呈紅色-上海鄭核

一、實(shí)驗(yàn)器材及試劑

1、實(shí)驗(yàn)器材

名稱 廠家 型號

脫水機(jī) 武漢俊杰電子有限公司 JJ-12J

包埋機(jī) 武漢俊杰電子有限公司 JB-P5

病理切片機(jī) 上海徠卡儀器有限公司 RM2016

凍臺 武漢俊杰電子有限公司 JB-L5

組織攤片機(jī) 浙江省金華市科迪儀器設(shè)備有限公司 KD-P

烤箱 天津市萊玻瑞儀器設(shè)備有限公司 GFL-230

載玻片 Servicebio

正置光學(xué)顯微鏡 日本尼康 Nikon Eclipse E100

成像系統(tǒng) 日本尼康 Nikon DS-U3

2、主要實(shí)驗(yàn)試劑

試劑名稱 廠家 貨號

無水乙醇 國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司 100092683

二甲苯 國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司 10023418

剛果紅染液套裝 Servicebio G1056

蘇木素染液 servicebio G1004

分化液 servicebio G1005-3

返藍(lán)液 servicebio G1005-4

中性樹膠 國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司 10004160

二、實(shí)驗(yàn)步驟

1、石蠟切片脫蠟至水：依次將切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-無水乙醇Ⅰ5min-無水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min，自來水洗。

2、剛果紅染色：切片入剛果紅染液1h，自來水洗2min。

3、背景分化：氫氧化鉀溶液分化，至陽性斑塊明顯，背景基本無色，自來水洗。

4、蘇木素染色：切片入蘇木素染液染3-5min，自來水洗，分化液分化，自來水洗，返藍(lán)液返藍(lán)，流水沖洗。

5、脫水封片：切片依次放入無水乙醇I 5min -無水乙醇II 5min-無水乙醇Ⅲ5min -二甲苯Ⅰ5min -二甲苯Ⅱ5min透明，中性樹膠封片。

6、顯微鏡鏡檢，圖像采集分析。

三、結(jié)果判讀：

淀粉樣蛋白呈紅色，細(xì)胞核呈淺藍(lán)色。

四、注意事項(xiàng)：

1、區(qū)分甲狀腺膠質(zhì)、彈力纖維和膠原纖維，可能都會染成紅色；

2、分化時要掌握恰當(dāng)，分化不足，膠原纖維也呈紅色，分化過度，淀粉樣變蛋白也可脫色。

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