無(wú)菌室一般是在微生物實(shí)驗(yàn)室內(nèi)專(zhuān)辟一個(gè)小房間??梢杂冒宀暮筒AЫㄔ臁C娣e不宜過(guò)大,約 4 — 5 平方米即可,高 2.5 米左右。無(wú)菌室外要設(shè)一個(gè)緩沖間,緩沖間的門(mén)和無(wú)菌室的門(mén)不要朝向同一方向,以免氣流帶進(jìn)雜菌。無(wú)菌室和緩沖間都必須密閉。室內(nèi)裝備的換氣設(shè)備必須有空氣過(guò)濾裝置。
規(guī)程
1.無(wú)菌室應(yīng)設(shè)有無(wú)菌操作間和緩沖間,無(wú)菌操作間潔凈度應(yīng)達(dá)到10000級(jí),室內(nèi)溫度保持在18-24℃,濕度保持在45-65%。超凈臺(tái)潔凈度應(yīng)達(dá)到100級(jí)。
2.無(wú)菌室應(yīng)保持清潔,嚴(yán)禁堆放雜物,以防污染。
3.嚴(yán)防一切器材和培養(yǎng)基污染,已污染者應(yīng)停止使用。
4.無(wú)菌室應(yīng)備有工作濃度的液,如5%的甲酚溶液,75%的酒精,0.1%的新潔爾滅溶液,等等。
5.無(wú)菌室應(yīng)定期用適宜的液清潔,以保證無(wú)菌室的潔凈度符合要求。
6.需要帶入無(wú)菌室使用的儀器,器械,平皿等一切物品,均應(yīng)包扎嚴(yán)密,并應(yīng)經(jīng)過(guò)適宜的方法。
7.工作人員進(jìn)入無(wú)菌室前,必須用肥皂或液洗手,然后在緩沖間更換專(zhuān)用工作服,鞋,帽子,口罩和手套(或用75%的乙醇再次擦拭雙手),方可進(jìn)入無(wú)菌室進(jìn)行操作。
8.無(wú)菌室使用前必須打開(kāi)無(wú)菌室的紫外燈輻照30分鐘以上,并且同時(shí)打開(kāi)超凈臺(tái)進(jìn)行吹風(fēng)。操作完畢,應(yīng)及時(shí)清理無(wú)菌室,再用紫外燈輻照30分鐘。
9.供試品在檢查前,應(yīng)保持外包裝完整,不得開(kāi)啟,以防污染。檢查前,用75%的酒精棉球外表面。
10.每次操作過(guò)程中,均應(yīng)做陰性對(duì)照,以檢查無(wú)菌操作的可靠性。
11.吸取菌液時(shí),必須用吸耳球吸取,切勿直接用口接觸吸管。
12.接種針每次使用前后,必須通過(guò)火焰灼燒,待冷卻后,方可接種培養(yǎng)物。
13.帶有菌液的吸管,試管,培養(yǎng)皿等器皿應(yīng)浸泡在盛有5%來(lái)蘇爾溶液的桶內(nèi),24小時(shí)后取出沖洗。
14.凡帶有活菌的物品,必須經(jīng)后,才能在水下沖洗,嚴(yán)禁污染下水道。
準(zhǔn)備工作
1. 先進(jìn)行無(wú)菌室空間的,開(kāi)啟紫外燈30—60分鐘
2. 檢驗(yàn)用的有關(guān)器材, 搬入無(wú)菌室前必須分別進(jìn)會(huì)
3. 操作人員必須將手清洗,穿戴好無(wú)菌工作衣、帽和鞋,才能進(jìn)入無(wú)菌室
4. 進(jìn)入無(wú)菌室后再一次手部,然后才進(jìn)行檢驗(yàn)操作
無(wú)菌室內(nèi)天花板應(yīng)與風(fēng)管、管道、燈具、風(fēng)口等的安裝脫開(kāi),光滑、無(wú)裂縫,易于清洗。無(wú)菌室的門(mén)窗材料應(yīng)選擇耐受性好、自然變形小、制造誤差小、容易控制縫隙、氣密性好的材料,采用雙層中空玻璃結(jié)構(gòu)的雙層窗,既節(jié)約空間、又節(jié)約能源,還可以避免玻璃窗結(jié)露引起霉變,造成污染;窗盡量采用大玻璃,這樣可減少積灰點(diǎn),又有利于清潔工作。