無(wú)菌室一般為4 — 5 平方米、高 2.5 米的獨(dú)立小房間（與外間隔離），專(zhuān)辟于微生物實(shí)驗(yàn)室內(nèi)，可以用板材和玻璃建造。無(wú)菌室外要設(shè)一個(gè)緩沖間，錯(cuò)開(kāi)門(mén)向，以免氣流帶進(jìn)雜菌。無(wú)菌室和緩沖間都必須密閉、室內(nèi)裝備的換氣設(shè)備必須有空氣過(guò)濾裝置。在獲得了無(wú)菌環(huán)境和無(wú)菌材料后，只有保持無(wú)菌狀態(tài)，才能對(duì)某種特定的已知微生物進(jìn)行研究。

規(guī)程

1.無(wú)菌室應(yīng)設(shè)有無(wú)菌操作間和緩沖間，無(wú)菌操作間潔凈度應(yīng)達(dá)到10000級(jí)，室內(nèi)溫度保持在18-24℃，濕度保持在45-65%。超凈臺(tái)潔凈度應(yīng)達(dá)到100級(jí)。

2.無(wú)菌室應(yīng)保持清潔，嚴(yán)禁堆放雜物，以防污染。

3.嚴(yán)防一切器材和培養(yǎng)基污染，已污染者應(yīng)停止使用。

4.無(wú)菌室應(yīng)備有工作濃度的液，如5%的甲酚溶液，75%的酒精，0.1%的新潔爾滅溶液，等等。

5.無(wú)菌室應(yīng)定期用適宜的液清潔，以保證無(wú)菌室的潔凈度符合要求。

6.需要帶入無(wú)菌室使用的儀器，器械，平皿等一切物品，均應(yīng)包扎嚴(yán)密，并應(yīng)經(jīng)過(guò)適宜的方法。

7.工作人員進(jìn)入無(wú)菌室前，必須用肥皂或液洗手，然后在緩沖間更換專(zhuān)用工作服，鞋，帽子，口罩和手套(或用75%的乙醇再次擦拭雙手)，方可進(jìn)入無(wú)菌室進(jìn)行操作。

8.無(wú)菌室使用前必須打開(kāi)無(wú)菌室的紫外燈輻照30分鐘以上，并且同時(shí)打開(kāi)超凈臺(tái)進(jìn)行吹風(fēng)。操作完畢，應(yīng)及時(shí)清理無(wú)菌室，再用紫外燈輻照30分鐘。

9.供試品在檢查前，應(yīng)保持外包裝完整，不得開(kāi)啟，以防污染。檢查前，用75%的酒精棉球外表面。

10.每次操作過(guò)程中，均應(yīng)做陰性對(duì)照，以檢查無(wú)菌操作的可靠性。

11.吸取菌液時(shí)，必須用吸耳球吸取，切勿直接用口接觸吸管。

12.接種針每次使用前后，必須通過(guò)火焰灼燒，待冷卻后，方可接種培養(yǎng)物。

13.帶有菌液的吸管，試管，培養(yǎng)皿等器皿應(yīng)浸泡在盛有5%來(lái)蘇爾溶液的桶內(nèi)，24小時(shí)后取出沖洗。

14.凡帶有活菌的物品，必須經(jīng)后，才能在水下沖洗，嚴(yán)禁污染下水道。

操作過(guò)程注意事項(xiàng)

1． 動(dòng)作要輕，不能太快，以免攪動(dòng)空氣增加污染；玻璃器皿也應(yīng)輕取輕放，以免破損污染環(huán)境

2． 操作應(yīng)在近火焰區(qū)進(jìn)行。

3． 接種環(huán)、接種針等金屬器材使用前后均需灼燒，灼燒時(shí)先通過(guò)內(nèi)焰，使殘物烘干后再灼燒

4． 使用吸管時(shí)，切勿用嘴直接吸、吹吸管，而必須用洗耳球操作。

5． 觀(guān)察平板時(shí)不好 開(kāi)蓋，如欲沾取菌落檢查時(shí)，必需靠近火焰區(qū)操作，平皿蓋也不能 大開(kāi)，而是上下蓋適當(dāng)開(kāi)縫。

6． 進(jìn)行可疑致病菌涂片染色時(shí)，應(yīng)使用夾子夾持玻片，切勿用手 直接拿玻片，以免造成污染，用過(guò)的玻片也應(yīng)置于液中浸泡，然后再洗滌。

7． 工作結(jié)束，收拾好工作臺(tái)上的樣品及器材，后用液擦拭工作臺(tái)。

無(wú)菌室內(nèi)配置了百級(jí)超凈工作臺(tái)也并不是所有都可以進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的，一般常規(guī)的菌落總數(shù)、微生物培養(yǎng)、血細(xì)胞培養(yǎng)、研究、干細(xì)胞研究、大腸菌等實(shí)驗(yàn)可以在百級(jí)超凈臺(tái)進(jìn)行。但是如果需要做致病，為了達(dá)到保護(hù)實(shí)驗(yàn)室人員的問(wèn)題，就必須得建造生物實(shí)驗(yàn)室，使用生物柜進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。該類(lèi)實(shí)驗(yàn)不能在普通的無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行。