脫細(xì)胞基質(zhì)修復(fù)凝膠高速膠體磨,細(xì)胞外基質(zhì)提取設(shè)備,組織修復(fù)再生材料,脫細(xì)胞基質(zhì),重組彈性蛋白復(fù)合凝膠,高速濕法粉碎機(jī)
組織器官的修復(fù)與重建是指組織、器官損傷后由臨近健康細(xì)胞通過再生來修補(bǔ)恢復(fù)的過程,由于組織自發(fā)愈合過程固有的缺陷,一旦組織和器官出現(xiàn)缺損或功能障礙時(shí),就會(huì)造成一定程度上的再生障礙或者是性缺損。因此組織器官的修復(fù)與重建一直是生物、醫(yī)學(xué)等相關(guān)領(lǐng)域的焦點(diǎn)。伴隨著對(duì)組織再生修復(fù)機(jī)制及組織工程學(xué)研究的開展和深入,尋找及研制各種有應(yīng)用價(jià)值的可吸收并能促進(jìn)再生的生物物質(zhì),已經(jīng)成為該領(lǐng)域的一個(gè)熱點(diǎn)。
細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix,ECM)是由動(dòng)物細(xì)胞合成并分泌到細(xì)胞外、分布在細(xì)胞表面或細(xì)胞之間的大分子,主要成分包括膠原纖維、糖蛋白、黏蛋白等,其他成分有氨基葡聚糖(透明質(zhì)酸、硫酸軟骨素)等糖類,還有一些脂質(zhì)和生長(zhǎng)因子。這些物質(zhì)構(gòu)成復(fù)雜的網(wǎng)架結(jié)構(gòu),支持并連接組織結(jié)構(gòu),調(diào)節(jié)組織的發(fā)生和細(xì)胞的生理活動(dòng),在細(xì)胞遷移、分化和增殖方面有著重要的作用。由于細(xì)胞外基質(zhì)可以來源于不同的組織器官,因此不同組織器官的脫細(xì)胞基質(zhì)在成分和三維超微結(jié)構(gòu)上也存在差異,研究證實(shí),源自相同組織器官的細(xì)胞外基質(zhì)在修復(fù)相同組織器官的損傷時(shí)效果更好,Wang等比較了人脂肪脫細(xì)胞基質(zhì)和脫細(xì)胞小腸黏膜上皮微粒的體內(nèi)成脂能力,結(jié)果表明人脂肪脫細(xì)胞基質(zhì)更能有效誘導(dǎo)脂肪組織的形成。
異種或異體細(xì)胞抗原由于被宿主認(rèn)為是外來體,因此引發(fā)了宿主的炎性反應(yīng)和免疫介導(dǎo)的排斥反應(yīng)。然而細(xì)胞外基質(zhì)是結(jié)構(gòu)蛋白和功能蛋白的復(fù)合物,該組分常常在不同物種間保守,并能被異種受體耐受。許多動(dòng)物組織器官和人體具有相似的細(xì)胞外基質(zhì)成分和結(jié)構(gòu),通過脫細(xì)胞技術(shù)獲得的ECM生物支架已被廣泛應(yīng)用與人體組織重建,如心臟膜瓣、皮膚、肌腱和硬腦膜等,其三維結(jié)構(gòu)與體內(nèi)細(xì)胞生長(zhǎng)的天然環(huán)境接近,不僅可以起著支架材料的作用,而且包含多種生長(zhǎng)因子,在組織修復(fù)和重建中有重要促進(jìn)作用。
脫細(xì)胞基質(zhì)凝膠大致工藝:
粉碎的脫細(xì)胞基質(zhì),加入3%冰乙酸溶液中(pH值:2.7),
將其加入反應(yīng)釜中,不斷攪拌,進(jìn)行研磨,過程控制溫度:35℃下,頻率:50Hz,次數(shù):1次,研磨至粒徑小于100μm,出料。
注射用修飾透明質(zhì)酸鈉-重組彈性蛋白復(fù)合凝膠大致工藝:
①將部分交聯(lián)凝膠加入進(jìn)入均質(zhì)混合(過程控制溫度:<25℃,頻率:50Hz,次數(shù):2次);
②將溶脹后的凝膠進(jìn)行均質(zhì)混合(過程控制溫度:<25℃,頻率:20Hz,次數(shù):1次)
對(duì)細(xì)胞外基質(zhì)中的營(yíng)養(yǎng)因子和生長(zhǎng)因子破壞小,修復(fù)效果好;同時(shí)能夠快速有效的脫除細(xì)胞,并且限度的保留細(xì)胞外基質(zhì)成分的活性。
影響研磨粉碎結(jié)果的因素有以下幾點(diǎn):
1膠體磨磨頭頭的剪切速率 (越大,效果越好)
2膠體磨頭的齒形結(jié)構(gòu)(分為初齒,中齒,細(xì)齒,超細(xì)齒,約細(xì)齒效果越好)
3 物料在研磨腔體的停留時(shí)間,研磨粉碎時(shí)間(可以看作同等的電機(jī),流量越小,效果越好)
4循環(huán)次數(shù)(越多,效果越好,到設(shè)備的期限,就不能再好)
線速度的計(jì)算
剪切速率的定義是兩表面之間液體層的相對(duì)速率。
剪切速率(s-1) =v 速率(m/s)
g定-轉(zhuǎn)子 間距(m)
由上可知,剪切速率取決于以下因素:
轉(zhuǎn)子的線速率
在這種請(qǐng)況下兩表面間的距離為轉(zhuǎn)子-定子 間距。IKN定-轉(zhuǎn)子的間距范圍為0.2 ~ 0.4 mm
速率V= 3.14 X D(轉(zhuǎn)子直徑)X轉(zhuǎn)速RPM / 60
脫細(xì)胞基質(zhì)修復(fù)凝膠高速膠體磨,細(xì)胞外基質(zhì)提取設(shè)備,組織修復(fù)再生材料,脫細(xì)胞基質(zhì),重組彈性蛋白復(fù)合凝膠,高速濕法粉碎機(jī)